随着对SARS-CoV2生物学的广泛研究需求的增加,对SARS-CoV2的诊betway必威官方网站断新型冠状病毒肺炎感染的细胞培养在很大程度上依赖于仔细和无菌的标本收集。这是专门的病毒传输介质(VTM)以保护病毒免受环境破坏,并通过适当的可持续运输系统维持其活动。
多年来,已经制定了各种运输介质,包括早期的细菌运输介质。尽管一些棉签-试管组合已被证明既有效又方便,但应避免使用对病毒或培养物有毒的棉签。在液体传输介质中,蔗糖基和肉汤基介质似乎是最受欢迎的,而一些实验室甚至使用E-MEM介质和无菌PBS。
世界卫生组织和疾病预防控制中心的病毒传播介质指南
鉴于…COVID-19大流行,专门的传输介质可以在诊断前更有效地使用病毒培养物。世界卫生组织(卫生组织)而且美国疾病控制与预防中心最近提出了一些制备VTM的指南,以鼓励更多的实验室制备有效的病毒传输介质。
根据世卫组织的规定,收集人类患者鼻腔和咽喉拭子的合适病毒传输介质由以下试剂配制:10g小牛肉输液汤和2g牛白蛋白馏分在无菌蒸馏水(400毫升)中。为避免污染,还应加入0.8 ml硫酸庆大霉素溶液(50 mg/ml)和3.2 ml两性霉素B(250µg/ml)。
根据CDC指南,VTM试剂可以是:含钙镁离子的HBSS, 2%热灭活FBS, 100µg/ml硫酸庆大霉素和0.5µg/ml双性霉素b。为了进行无菌检查,CDC建议使用血液琼脂板检查孵育后的微生物生长情况。
如果VTM整除储存时,温度取决于储存时间。对于48小时-96小时的最佳储存时间,无菌介质应在2至8摄氏度的温度下储存而不冻结。对于更长的存储时间,小瓶可以存储在-20摄氏度,直到使用,但人们应该不惜任何代价防止冻融循环。
VTM如何对SARS-CoV-2运输有效?
病毒转运培养基的营养成分和pH值使其成为从患者体内运送病毒标本到实验室的理想培养基。HBSS经BSA、半胱氨酸、明胶、蔗糖和谷氨酸修饰和丰富,有助于保持冠状病毒在运输过程中的活力。通过添加万古霉素、两性霉素B和庆大霉素,VTM还可以选择性地抑制细菌或真菌的生长。培养基被设计成与原代细胞培养物具有生物相容性。培养基中的蔗糖在较低温度下储存较长时间时,进一步促进病毒的生存能力。通常,VTM附带鼻咽和/或口咽拭子用于收集,然后立即将拭子放入含有介质的无菌管中,以保持最佳病毒载量。
AdvancellsTMVTM工具包
批准ICMR并由国家病毒学研究所, AdvancellsTM病毒传输介质是根据世卫组织和CDC指南专门制造的。该套件有三种棉签选项:棉、聚酯和尼龙,可定制塑料或木棍。此外,除了防泄漏包装,AdvancellsTMVTM保证标准化的生产和质量控制,尽量减少批次之间的差异。有关VTM套件的查询,请填写以下表格或浏览https://advancellsgroup.com/vtm.php