虽然大多数实验室报告都充满了“突破性”的结果,但很少有文章指出了正确鉴定细胞和细胞原代培养的重要性。考虑到“错误身份”问题是正确研究的巨大障碍,这一点变得非常重要。betway必威官方网站引用文献中的一个例子,我们可以看到从Henrietta Lacks(一名30岁的非裔美国女性)宫颈癌活检中分离出来的HeLa细胞。必威体育娱乐平台据报道,一些细胞系被海拉细胞污染。一篇发表于病理学与检验医学档案许多小鼠细胞系和乳腺癌细胞系原来是海拉细胞!必威体育娱乐平台
Phuchareon和他的团队在2009年报道了另一个错误识别细胞的例子《公共科学图书馆•综合》.细胞系以唾液腺为靶点的腺样囊性癌(ACC)已被证实,并被常规用于了解这种恶性肿瘤的生物学,其10年生存率为40%。基于短串联重复序列(STR)的6个这样的细胞系的遗传分析揭示了其他东西!ACCNS和CAC2系被小鼠细胞污染,ACC2、ACC3和ACCM被HeLa细胞污染,在ACCS细胞系中发现膀胱细胞!
betway必威官方网站Di Girolamo及其团队于2016年在调查眼科学与视觉科学发现sv40转化的人角膜上皮细胞系被污染原代人角膜上皮细胞.研究小组最初想评估人类角膜细胞在存储库中的存活能力。其中一种维持角膜的方法是将角膜浸泡在30°C至37°C的Eye Bank器官培养基(EBOCM)中,称为器官培养保存。虽然大多数样品显示出活力,但2个样品显示出高增殖的小细胞。
表型分析显示,这些细胞为K3阳性(角膜标记物),也含有K15(干细胞标记物),无刺激免疫反应的抗原。然而,由于这些细胞表现出非角膜原代细胞样扩张,因此对它们进行了病毒测试。由于实验室之前的工作涉及到SV40永生HCEC系的使用,对SV40的测试揭示了这种病毒在初级角膜中的存在!这是由于培养技术落后或意外接种错瓶造成的。
由于这种污染浪费了大量的能源和资源,研究人员坚持认为鉴定的重要性betway必威官方网站必威体育娱乐平台癌细胞系经常。附加分保养好小学文化不受污染的包括:
- 未使用的材料应予丢弃
- 在同一时间,只有一种类型的细胞培养是必要的。如果要使用不同的细胞,应使用单独的培养罩和培养箱。
- 避免使用同事使用过的试剂
- 按常规间隔对单元进行身份验证是很重要的。
因此,虽然小学文化是研究生物学、发病机制和筛选的重要工具,避免污染也是至关重要的,这样研究才能不间断地继续挖掘生物学的更深层次的秘密。betway必威官方网站
引用:
Lucey BP, Nelson-Rees WA, Hutchins GM. Henrietta缺乏HeLa细胞和细胞培养污染。病理学与检验医学档案.2009;133: 1463 - 1467。
Phuchareon J, Ohta Y, Woo JM, Eisele DW, Tetsu O.遗传分析揭示了6种腺样囊性癌细胞系ACC2、ACC3、ACCM、ACCNS、ACCS和CAC2的交叉污染和错误识别。《公共科学图书馆•综合》.2009;4: e6040。
尼克·迪·吉罗拉莫,莎伦·周,亚历克斯·理查森,丹尼斯·韦克菲尔德;用sv40转化的人角膜上皮细胞系污染原代人角膜上皮细胞:细胞生物学家在良好实验室实践中的一课。调查眼科学与视觉科学。57 2016;(2): 611 - 616。