你是否曾经因为微生物污染而不得不重复整个细胞培养实验?这是大多数细胞生物学家一生中至少会遇到一次的普遍问题。虽然很多努力已经即兴的细胞培养模型和技术,有很多对质量控制(QC)措施的无知。高质量的文化需要严格的质量保证措施。QC不仅确保无菌性,而且有助于产生可重复和可靠的结果。额外的谨慎也可以节省大量的时间、金钱和精力。必威体育客户端网站Kosheeka为您的研究应用提供了一系列高质量的初级培养,因此您可以确保最高的可靠性。betway必威官方网站
原代细胞培养质量控制措施:
微生物测试
在设置时主要的文化,必须从获取来源组织开始进行例行的污染物筛查。微生物污染物的主要类型包括真菌、细菌和支原体。虽然抗生素如青霉素、链霉素或两性霉素可添加到培养基中,但通常不鼓励常规使用。过度使用抗生素会使培养物产生耐药性,而且往往会掩盖严重污染物的存在。相反,从长远来看,关注无菌培养技术可能更有益。另一种污染物,支原体对抗生素有相当的抗药性,很难检测。目前,基于PCR和ELISA检测的支原体检测试剂盒越来越受欢迎。此外,还应进行内毒素检测,以确保培养物的最大限度无菌。
试剂和塑料制品的质量
为了建立高质量的培养,必须从知名制造商采购高质量的培养级试剂。血清是支原体和病毒的主要来源。每批产品在使用前必须储存在适当的温度下并进行污染物测试。必须记录批号和有效期,培养基和其他试剂如胰蛋白酶也是如此。实验室级无菌水必须用于试剂的重组和缓冲液的制备。
无菌技术
无菌技术的关键是良好的个人卫生、无菌操作和无菌工作场所。良好的个人卫生包括在进入培养室前洗手、戴帽子、口罩和穿长袍,以减少污染物的可能性。生物安全柜每次使用前和使用后必须用无纺布用70%酒精擦拭,并用紫外线消毒。高效空气过滤器也必须定期清洗和更换。最后,必须始终确保无菌处理和良好的培养实践,以避免污染细胞、试剂或工作区域。
采购及废物处置
一种特殊的污染来源是细胞的起源组织。培养细胞前必须对组织进行净化。在妥善处理废物后,安全弃置亦很重要。
记录
虽然记录的重要性经常被忽视,但它可以极大地帮助找出错误,并创建有纪律的文化实践。保持恒温箱、水浴和冰箱的温度图表,并保持所有实验室设备的日志簿是良好实验室实践的关键。此外,所有设备必须定期校准。