心肌细胞生物学研究的原代培养

心肌细胞生物学

根据世界卫生组织(世卫组织),心血管疾病心血管病(cvd)是指冠心病、风湿性心脏病等以心脏和血管为目标的一组疾病。这些疾病在全世界的死亡人数中排名第一,每年约有1790万人死于这些疾病!世界卫生组织还列出,心血管疾病导致的5例死亡中,有4例死于心脏病发作和中风,占1/3理查德·道金斯其中70岁以下的人死亡。美国疾病预防与控制中心(Centers for Disease Prevention and Control)的数据显示,美国每37秒就有一人死于心血管疾病!

多年来,这些统计数据导致了许多研究,以了解心肌细胞的功能和疾病途径。betway必威官方网站这也可以设计治疗心血管疾病的方法。心肌细胞原代培养已从小鼠、大鼠、猫、兔和人体内获得,培养时间较短。

主要的文化已报道心肌细胞坏死持续2-3周。从出生后心脏分离出的细胞数量很少,因为这些细胞通常不会在培养中增殖。新生儿心肌细胞的使用面临着在培养几周后失去其收缩性的挑战。这是因为心脏除了收缩心肌细胞外,还含有内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞等非收缩细胞。在这些细胞中,成纤维细胞的生长速度快,可以超过心肌细胞的生长,甚至阻碍细胞的收缩或引起去分化。这要求来自心脏样本的原代心肌细胞培养不受其他细胞的影响。

为了在培养中充实心肌细胞,已经尝试了几种方法。一种方法是使用预镀步骤。这是因为非心肌细胞比心肌细胞能更快地附着在培养板上。另一种方法是在培养基中使用靶向增殖的化学物质,如胞嘧啶-β-d-阿拉伯氨基呋喃苷和5-溴脱氧尿苷。然而,这些分子具有细胞毒性,是潜在的诱变剂。也有使用Percoll梯度从心肌细胞分离低密度的非心肌细胞。然而,这个系统也仅限于完全去除非心肌细胞,尤其是成纤维细胞!

Phong和他的团队发表在美国生理学杂志-细胞生理学讨论了使用高氯酸四甲基罗丹明甲酯(TMRM)的心肌细胞原代培养:一种标记线粒体以充实心肌细胞的荧光染色剂。将高剂量的染色细胞培养成活的新生大鼠心肌细胞。细胞可以保持自发收缩性,并显示对变时剂(显示功能性肾上腺素能受体和毒蕈碱受体的表达)和钙循环的反应。

这样的主要的文化对心肌细胞的发育过程进行研究。它们还可以用于评估用于治疗心血管疾病的潜在化合物的毒性。这种评估可以在基因组和电生理水平上进行。它们还提供了令人兴奋的观赏途径细胞疗法心肌细胞与干细胞!

引用:

https://www.who.int/health-topics/cardiovascular-diseases/#tab=tab_1

https://www.cdc.gov/heartdisease/facts.htm

Phong D. Nguyen, Sarah T. Hsiao, priyadharshini vakumaran, Shiang Y. Lim和Rodney J. Dilley。原代培养中新生大鼠心肌细胞的富集有利于体外收缩能力的长期维持美国生理学杂志-细胞生理学2012 303:12, c1220-c1228。

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