利用原代培养评估肾脏毒性和研究癌症必威体育娱乐平台

评估肾脏毒性的原代培养

除了高中教科书中列出的肾脏的正常功能外,它是许多异种生物的目标,也会产生肿瘤。根据发表在betway必威官方网站临床泌尿生殖系统癌必威体育娱乐平台2019年,Saad和他的团队在美国诊断出了65340例最常见的肾癌——肾细胞癌(RCC),估计死亡率为14970例。必威体育娱乐平台它被描述为6th男性恶性肿瘤的病因10th以女性为例。RCC在组织学上有多种类型——80 - 85%的肾细胞肿瘤是起源于近端小管上皮的常规或透明细胞。10%为乳头状RCC, 5%为憎色性RCC原代培养。

为了评估毒物的影响或肿瘤的发展机制,从而开发一个适当的治疗系统需要在体外模型。考虑到RCC的确切原因尚不清楚,这一点变得尤为重要。这种疾病对传统的治疗方法,如化疗或放射治疗也表现出耐药性。此外,测试新的化学分子靶向癌症的能力也需要健康的细胞。必威体育娱乐平台这可以突出可能的毒性作用。

在各种细胞中,皮质的重要部分是人近端小管上皮细胞(HPTEC)。这些细胞是金属、抗生素和其他药物的目标。使用永生的挑战必威体育娱乐平台癌细胞系他们改变后的角色是否不能真实地再现现实在活的有机体内组织。

为了研究与药物性损伤相关的过程在体外主要的文化让他们进来。这些系统虽然很有代表性在活的有机体内在评估组织时,组织也不会受到干扰。为了特异性分离HPTECs, Percoll离心或显微分离等方法已被报道。然而,这些方法面临着低产量和所需时间和人力的挑战。

瓦伦蒂领导的一个团队发表了一个60分钟的方案PlosOne从肾组织样本中培养HPTEC。一旦确定,对样本进行处理,去除囊和邻近的髓质,然后用冰冷的HBSS清洗。将切碎的组织与胶原酶混合在培养基中,然后通过100µm、70和40µm过滤器进行筛分。推荐培养基为DMEM/F-12和GlutaMAX-I™,补充10%热灭活胎牛血清(FBS)、青霉素/链霉素、真菌素和人转铁蛋白。人肾肿瘤细胞(HRTC)也可以在RPMI 1640培养基上培养。

未检出成纤维细胞主要的文化细胞呈现出预期的鹅卵石状和圆顶状形态。细胞也表达上皮细胞标记物细胞角蛋白和近端小管标记物氨基肽酶a。RCC原代培养也表现出混合形态,这与研究显示的异质性一致。betway必威官方网站

因此,这种肾细胞的原代培养可以避免使用动物模型,不仅存在伦理问题,而且还存在物种差异。除了研究肿瘤和测试潜在药物外,使用透膜过滤支架可以更接近实际情况在活的有机体内近端小管的组织和药物运输。因此,这可以推动科学实现解决癌症等威胁我们生存的严重疾病的目标。必威体育娱乐平台

引用:

萨阿德,A. M.,盖德,M. M., Al-Husseini, M. J.,鲁班,I. A., Sonbol, M. B. & Ho, T. H.(2019)。近20年来美国肾细胞癌发病率和死亡率的趋势:一项基于seer的研究临床泌尿生殖系统癌必威体育娱乐平台17(1) 46 - 57. e5。DOI: 10.1016 / j.clgc.2018.10.002

瓦伦蒂,M. J.,恩里克,R.,科斯塔,V. L., Jerónimo, C.,卡瓦略,F.,巴斯托斯,M. L.,……卡瓦略,M.(2011)。一个快速和简单的程序,建立人类正常和癌症肾原代细胞培养从手术标本。必威体育娱乐平台《公共科学图书馆•综合》6(5) e19337。DOI: 10.1371 / journal.pone.0019337

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