原代细胞培养技巧

细胞培养技巧

原代细胞直接从活组织中分离出来,在体外培养。这些细胞没有过度繁殖,也就是说,它们经历了很少的传代次数,因此,具有亲本组织的原生特征。原代细胞不应与细胞系混淆,因为细胞系是由原代细胞的永生培养物培养而来。

随着原代细胞在临床转化betway必威官方网站领域的应用,生物医学研究正在获得一个更高的境界。原代细胞在3D建模、生物打印、组织工程、癌症研究、必威体育娱乐平台细胞疗法等,但当涉及到在实验室中研究原代细胞时,研究人员面临着各种问题。betway必威官方网站这篇文章包含了一些细胞培养的技巧和技巧,可以帮助减轻这些问题,使工作与原代细胞更容易。

细胞生长要求

原代细胞既可以在悬浮(不需要固体表面生长的细胞)培养物上生长,也可以在贴壁(需要固体表面生长的细胞)培养物上生长。由于原代细胞培养的污染几率较高,因此在生长培养基中添加抗生素是至关重要的。

为了延长细胞的寿命,细胞培养的处理技能应该优秀;此外,适宜的培养条件,如pH值、生长因子、浓度、生长介质、温度、营养物质的存在和葡萄糖是必不可少的。建议采用无菌技术。

细胞培养合流

在贴壁培养中,细胞汇合指的是培养容器中附着细胞的表面积。例如,100%的细胞汇合意味着细胞覆盖了血管的整个表面积,而50%的细胞汇合意味着细胞只覆盖了一半的表面积。这是一个需要跟踪的重要和关键参数,因为不同的细胞需要不同的汇流端点,即细胞需要传代培养的点。

维护和细胞传代培养

一旦细胞被分离并附着在培养容器表面,细胞的维护就开始了。从播种开始,细胞的附着大约需要12个小时。当达到所需的合流百分比并且细胞积极增殖时,就是传代培养的时候了。开始传代原代细胞培养的最佳时间是大约80-90%融合,因为完全融合的细胞在传代培养后可能会分化并开始表现出较慢的生长。

细胞低温保存

低温保存是用低温保存活细胞的方法。这通常是为了增加原代细胞的保质期。为了尽量减少实验过程中细胞的损伤和死亡,对细胞进行适当的冷冻保存是至关重要的。在原代细胞的情况下,DMSO通常与FBS一起用作冷冻保护剂。要了解更多信息,请阅读文章:http://必威体育客户端网站www.nekotozakka.com/best-tips-on-cell-culture-cryopreservation/

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