低温保存是必不可少的细胞培养维护生物医学实验室保存细胞以备将来使用的活动。需要了解和正确地进行低温保存的各个方面，以便在解冻后获得良好的存活细胞群，以便进行培养。考虑到这些问题，我们有一个专家会议萨钦·卡达姆博士关于低温保存的注意事项
SachinKadam博士他在干细胞研究方面拥有超过13年的经验，以他令人尊敬的专业知识和科学热情推动了Kosheeka的betway必威官方网站研究和开发。必威体育客户端网站在这篇文章中，我们提出了一个简短的关于我们的问答环节低温保存技术和伦理．
细胞培养研究人员更喜欢哪种类型的螺纹冷冻瓶:内部的还是外部的?betway必威官方网站
一些研究人betway必威官方网站员更喜欢外螺纹冷冻瓶，这样就没有外部颗粒或污染物进入瓶子，从而使其更安全的冷冻保存。然而，一些研究人员选择内螺纹betway必威官方网站小瓶，因为它们更适合于罐子和冷冻箱。
DMSO用作低温保鲜剂。对于原代细胞培养应用，您有什么建议?
DMSO溶液是细胞内的冷冻保存剂已经报道了许多用于组织冷冻的替代品，包括非渗透性冷冻保护剂，如葡萄糖、蔗糖、半乳糖或海藻糖，以及细胞内冷冻保护剂，如乙二醇、丙二醇、甘油、甲酰胺、甲醇和丁二醇。betway必威官方网站研究人员通常使用含有10% DMSO和FBS的冷冻培养基进行细胞培养，但一些文献报告建议使用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为DMSO的替代品。
低温保存方案中哪些要点应该主要关注?
在进行冷冻保存时，有一些要点需要注意。首先，冷冻质量好的细胞是一个重要的标准。betway必威官方网站研究人员应该意识到，高生存能力与高人口无关。传代2-3天后，细胞应冷冻，融合度低于90%。2 × 10^6个细胞/毫升是最典型的冷冻保存密度。其次，使用DMSO作为acryoprotecting代理与FBS或Ficoll一起加入冷冻介质。因此，研究人员应该在冷冻过程中使betway必威官方网站用新鲜试剂，以获得较高的回收效率。适用于-1°C/min的恒定冻结速率细胞培养应用程序。此外，保持低温瓶在-140°C和-180°C之间的蒸汽相，降低了漏瓶或意外损坏的风险。最后但并非最不重要的是，应将冷冻瓶放入37°C的水浴中快速解冻细胞，以防止渗透休克。
如果液氮的可用性是一个问题，有没有办法储存冷冻瓶?
-80°C的温度可能是储存原代细胞的短期替代选择，但在冷冻介质中使用10%的Ficoll 70和10%的DMSO有助于提高恢复活力。
我们感谢萨钦·卡达姆博士由于他对原代细胞培养冷冻保存的宝贵见解以及许多故障排除仍然等待着良好细胞培养实践过程中的其他各种关键点。查询任何有关低温贮藏或原代细胞培养实践，咨询Kosheeka必威体育客户端网站info@必威体育客户端网站www.nekotozakka.com