冷冻保存的肝细胞含有主要的药物代谢酶。对于生长的肝细胞培养，在低温保存的原代细胞的情况下执行快速解冻方案。然而，如果解冻过程不正确，原代细胞的活力和功能可能会受损。
抑制冷冻损伤效应
在进行肝细胞解冻之前，应该记住冷冻损伤现象。低温损伤除了对原代细胞有渗透作用外，还会引起细胞内和细胞外结冰，从而改变原生蛋白质构象。原代肝细胞的主要低温损伤是细胞膜破坏，DNA断裂，减少细胞附着。
减少低温损伤效应的一个简单方法是将原代肝细胞瓶从液氮迅速转移到37°C水浴中。在室温下，将小瓶肝细胞从液氮转移到细胞培养实验室应花费最少的时间。
时间很重要
冷冻保存的肝细胞过度解冻将导致低存活率和产量。通常60-80秒的时间就足够了。解冻后，迅速进行清洗和离心步骤以限制冷冻保护剂的毒性作用也是至关重要的。再悬浮也应以温和的摇摆运动，而不是旋涡或剧烈摇晃。
清洗和清除碎屑
单个洗涤步骤通常足以确保解冻后清洁的肝细胞培养种子。建议离心后抽吸上清，而不是倒出上清。倾倒有失去活细胞颗粒的风险。吸气时，吸入器的尖端应处于最高的介质水平，以确保在到达活细胞颗粒之前去除细胞碎片。
主要的肝细胞培养单层肝细胞，呈立方状，细胞核位于中心。解冻这些原代细胞通常需要对这个过程有一个简单的了解，以避免错误和限制低产量或不良的生存能力。如果您的实验室目前正在寻找原代肝细胞用于研究或工业用途，您可以联系betway必威官方网站必威体育客户端网站我们将为您提供最优质的细胞，以及专家技术支持和无忧的原代细胞培养实践。联系info@必威体育客户端网站www.nekotozakka.com作进一步查询。