在疾病生物学、细胞治疗和发育生物学领域,由于遗传差异和表征变形的限制,实验方法在使用细胞系时不会产生可重复的效率。因此,科学家们已经转向使用原代细胞和干细胞在体外细胞培养研究,以保持遗传完整性,生化信号,和细胞表型形态。虽然原代细胞是组织提取的细胞,没有被永生化,保留了身体细胞的原生功能,但干细胞是特殊的!
干细胞具有分化成各种细胞系的潜力,也可以像正常的原代细胞一样自我增殖。干细胞有两大类:胚胎干细胞(多能干细胞)和成体干细胞(多能干细胞)。胚胎干细胞可以分化成外胚层、内胚层和中胚层细胞谱系,帮助身体从囊胚期发育。另一方面,成体干细胞补充成体组织,帮助修复和恢复活力。
干细胞培养
干细胞已被用于从基因组学到再生医学的各种研究,但培养干细胞betway必威官方网站对许多研究人员来说一直是一个公平的挑战。让我们讨论两种常见的干细胞培养系统,以及如何描述干细胞的高效培养。
干细胞培养系统的类型
饲料依赖干细胞培养系统
供体依赖干细胞培养用于干细胞它们与成纤维细胞等喂养细胞共培养。饲养细胞通过提供良好的细胞外培养基环境来支持干细胞的附着和增殖潜能。在大多数共培养系统中,小鼠胚胎成纤维细胞被丝裂霉素C灭活后用于阻止细胞周期。在其他一些情况下,人包皮成纤维细胞也被用作临床应用的无异种替代。这些成纤维细胞喂养细胞通常培养在预先涂有0.1%明胶的板上。
无饲料干细胞培养系统
在这样的系统中,馈线层被最佳的细胞外基质所取代。这些系统通过使用必需生长因子和氨基酸微调培养基,在促进培养的茎干性和抑制自发分化之间保持平衡。
在供体依赖的干细胞培养系统中,成纤维细胞在附着和干性调节中发挥着重要作用,但该系统的局限性包括严格的培养模型和开发干细胞和成纤维细胞的混合培养。而在无饲料茎培养系统中,具有易于操作、最适合大规模使用、不存在混合培养试验产量问题的优点。
干细胞的特性
在干细胞培养中,混合培养和交叉污染的问题是突出的,因此,随着先进的技术,研究人员已经采用了各种表征方法来检测影响细胞形态和功能的干性和异常。betway必威官方网站
- 观察细胞形态以从分化细胞中检测干细胞。
- 碱性磷酸酶染色,以区分饲养细胞从干细胞和维持细胞活力。
- 免疫染色和流式细胞术提供标记物表达结果。干细胞有阳性标记,如SSEA4, TRA-1-60, TRA-1-81,阴性标记,如CD44和SSEA1。可以通过检测这些标记来识别干细胞。
- 通过分子或细胞分析评估干细胞分化潜力。在分子分析的情况下,qPCR和免疫染色可以帮助研究人员检测特定的细胞谱系标记,以了解分化谱系和阶段。betway必威官方网站在细胞分析中,可以使用先进的免疫化学方法检测到中胚层(SMA)、内胚层(AFP)和内胚层(TUBB3/TUJ1)的特异性标记。
干细胞的应用
由于潜力干细胞为了自我更新和转分化为其他细胞系,研究人员已将这些细胞作为几个生物医学和临床研究领域的候选细胞,如身体组织的修复和再生、药物开发betway必威官方网站和测试、药物毒性、基因功能和基因组学、细胞治疗、基因治疗、免疫治疗、癌症研究、神经发育生物学研究、药理学、器官印迹和3D组织培养、患者来源的异种移植和类器官建模等。必威体育娱乐平台
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