废除使用鱼类原代培养的动物模型

鱼类初级养殖

在科学实验中使用动物涉及到伦理问题以及每个国家的具体规定。一个例子是1986年的《动物(科学)程序法案》,英国在对脊椎动物进行实验室工作时需要遵循该法案(https://www.legislation.gov.uk ukpga / 1986/14 /内容).在使用动物模型(如鱼类原代培养物)方面,人们对使用3Rs(减少、改进和替代)的认识有所提高。这可以降低或改进实验室中动物的使用。

的发展在体外减少实验室鱼类使用的系统是当前的需要。例如,20世纪90年代初,鱼肝和鱼鳃的培养发展从Oncorhynchus,我的吻或者彩虹鳟鱼。这些培养物比孤立的细胞更能代表生理机能。它们已被用于评估化学物质的代谢和运输,以及环境监测系统。毒理学和生物浓度分析领域也受益于这种鱼的使用主要的文化研究化学物质的吸收、代谢和排泄。这些观察结果可以从在体外在活的有机体内因此,代替使用活体动物来评估毒理学。特别是这种模型,初级肠道培养变得非常重要,因为环境污染物可以被饮食中吃鱼的人吸收!

有一些可用来评估化学品的测试,如经合组织测试第305号(鱼的生物积累:水和饮食暴露),使用动物。然而,这样的试验花费大量的时间,昂贵的,当然也有道德问题,当使用动物。其他方面还包括测试低可溶性疏水化合物的挑战。肠道培养的发展可以解决所有这些挑战。

由于肠道的反应是特定的,并且除了与其他细胞和微生物的复杂联系外,寿命也很短。劳拉领导的团队发表了从虹鳟鱼中培养出的初级肠上皮细胞的培养,雄鱼mykiss在生物公开赛。之所以选择这种生物,是因为它是评估毒理学的模型物种,因此可以使用这种培养物来测试药理学分子的ADME(吸收、分布、代谢和排泄)。

有趣的一点是,在增殖、分化和对毒素反应的肠段的变化。这在鱼类系统中尤为明显。作者认为,当肠上皮细胞的顶层像薄片一样允许细胞与细胞的接触时,肠上皮细胞的存活率就会增加。培养基方面,前、中、后肠细胞在L-15培养基上生长良好,最小必需培养基(MEM)支持幽门盲肠。也有报道称使用杜尔贝科改良的Eagle培养基(DMEM)效果良好。

7-乙氧基香豆素的代谢研究O-去乙基化(ECOD)水平与斑马鱼幼体相当。CYP3A在后肠的表达较多。总的来说,鱼主要的文化在3Rs-上领先一步减少用于研究饮食摄取的鱼的数量,取代使用活的动物和完善活鱼不会接触有毒化学物质的事实。

参考:

劳拉·m·兰根,斯图尔特·f·欧文,阿瓦希·n·杰哈。虹鳟鱼原代肠上皮细胞的建立和长期维持雄鱼mykiss.生物公开赛2018 7:bio032870doi: 10.1242/bio.032870。

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