根据2015年发表的研究betway必威官方网站生物医学研究国betway必威官方网站际根据弗洛伦西奥-席尔瓦及其团队的研究,除了保护身体外,骨骼还参与运动,包含重要的骨髓以及储存钙和磷酸盐。虽然它看起来没有生命,但骨骼显示出动态重塑,分别由称为破骨细胞和成骨细胞的细胞进行骨吸收和形成。精确的骨重塑对钙稳态和骨折修复具有重要意义。骨质形成和骨吸收之间的失衡会导致骨质疏松等骨质疾病,如果骨质吸收过多,则会导致骨质硬化。
总常驻骨细胞的4-6%被称为成骨细胞:成骨细胞。这些细胞来源于间充质干细胞(MSC)。这些细胞如何形成骨骼的各个方面以及调节这些细胞的过程都需要在体外成骨细胞培养。细胞培养的使用使科学家能够研究与成骨细胞的功能、分裂、存活和分化相关的重要机制。
几篇文章描述了从大鼠、小鼠和人类身体的许多部位分离和培养原始成骨细胞。尽管位置不同,细胞的行为相似在体外.从新生大鼠身上培养颅骨成骨细胞可以研究这些细胞的功能,因为这个过程很简单,可以产生大量的细胞。
从颅骨和长骨中分离出的成骨细胞可以量化细胞的骨形成。此外,细胞可以从未成熟阶段追踪到成熟阶段。细胞外环境是可以控制的主要的文化优势体内研究。因此,原代成骨细胞培养在骨研究中起着关键作用。betway必威官方网站
泰勒领导的研究小组报告了分离成骨细胞的关键点,从而可以对细胞功能和骨病进行各种研究。要点包括:
- 对于人类骨骼,经伦理批准,可以从计划进行全肩置换手术的骨关节炎患者中建立外植体培养。由于衰老或疾病样本(小鼠/大鼠/人类)含有更多的脂肪和骨髓,去除这些组织对防止细胞污染很重要。
- 推荐播种密度为1056孔板每孔细胞;5 × 10412孔板和2.5 × 10的电池424孔板。
- 细胞分离使用Accutase比胰蛋白酶- edta,从而降低非活细胞的问题。
- 在培养的第4天,啮齿动物的培养中可以看到一致性。在电子显微镜下可以看到骨骼的沉积和矿化。
- 从<40岁患者中分离出的人体样本在3周内形成骨结节。年龄、性别、种族和疾病状况影响骨培养。
- pH值维持在7.4是至关重要的,因为变化会影响矿化。
- αMEM和DMEM可用于大鼠成骨细胞的培养,αMEM适用于小鼠成骨细胞的培养。
- 形成了骨结节需要磷酸盐的来源,使用β-甘油磷酸在体外;适当和低水平是重要的(2毫米)。
引用:
Rinaldo Florencio-Silva, Gisela Rodrigues da Silva Sasso, Estela Sasso-Cerri, Manuel Jesus Simões和Paulo Sérgio Cerri。骨组织生物学:结构、功能和影响骨细胞的因素。生物医学研究国betway必威官方网站际2015;Article ID 421746: 17页。
张志刚,张志刚。人类和啮齿动物成骨细胞的研究进展。BoneKEy报告2014;3: 585。