抗体是人体免疫系统的重要组成部分。一旦被一种抗原感染,免疫系统就会产生一种针对该抗原的特异性抗体反应。抗体用于许多生物医学研究应用,以及用于疾病检测的免疫测定。betway必威官方网站因此,抗体纯化过程是传染病和免疫学研究中必不可少的研究步骤,其中原代细胞发挥着良好的模型作用。betway必威官方网站在这篇文章中,我们讨论了一些常规的抗体纯化策略:
常规抗体纯化策略
抗体纯化策略在色谱中普遍局限于蛋白A、蛋白G和蛋白L珠,因为结合能力取决于抗体类别。蛋白A和G珠比蛋白L珠更常用来分离人IgG,但不足以有效分离人IgD, IgA, IgM和IgE。
- 蛋白质A珠
蛋白质A是一种细胞壁成分金黄色葡萄球菌菌株。它是一个42kDa的单多肽链,共价偶联到珠状琼脂糖凝胶。这可以特异性地结合到免疫球蛋白分子的Fc区。这些珠粒对几种哺乳动物的IgG具有特殊的亲和力,但蛋白a与IgG亚类的结合效率差异允许单独的IgG类型结合。不与蛋白A结合的抗体可以从流动部分中回收。
- 蛋白G珠
G蛋白是来自G组链球菌的22kDa细胞壁蛋白。蛋白质A和蛋白质G虽然三级结构相似,但由于氨基酸组成的变化,两者的ig结合位点差异很大。蛋白G可以结合不同物种Ig的Fc和Fab区。
- 蛋白L珠
蛋白质L是一种来自细菌的35.8 kdaig结合蛋白消化链球菌属马格努斯.它以不同的结合亲和力结合不同Ig (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE和IgY)的VL结构域的k轻链。这种结合的重要标准取决于免疫球蛋白分子中K轻链的存在。蛋白L珠的例子是Capto L (GE),它可以高效地捕获IgG和IgM Ab片段。
在大多数情况下,传统的蛋白珠或树脂对抗体捕获是有效的,但对于某些物种、片段或感兴趣的蛋白质,用传统的策略很难分离。因此,开发创新的定制策略来优化抗体纯化是非常重要的。
抗体纯化是一门复杂而复杂的科学,对从事蛋白质工程研究的研究人员提出了许多挑战。betway必威官方网站随着细胞培养规模的扩大,研究人员必须提出更多的抗体纯化策略或设计新的抗体纯betway必威官方网站化策略。如果您正在进行抗体生产的原代细胞培养,请在制定纯化策略之前确保初始步骤确保研究效果。betway必威官方网站
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