低温保存是一种著名的实验室技术，用于在接近液氮(-196°C)的温度下存储细胞和其他生物材料。它为研究人员提供了一个备用方betway必威官方网站案，以防发育中的细胞因污染而受损，并且当现有的细胞培养已经发育了很长一段时间时，它允许使用早期传代细胞，从而有助于最大限度地减少遗传漂变的发生率。这篇文章介绍了冷冻和解冻细胞以保持它们存活的最佳程序。
- 在冷冻之前，检查细胞的健康状况
当细胞特性由于长时间传代而发生变化的机会极小时，最好以低传代数保存细胞。在真正冷冻细胞之前，用台盼蓝或其他活/死染色进行活力计数，以及清洁度和支原体检测以检查污染。
- 使用合适的冷冻介质
低温保存介质通常由生长介质、低温保护剂(如DMSO或甘油)和蛋白质供应(通常是血清)组成。虽然在冻融过程中需要低温保护剂来减少细胞应力，但可以省略血清;在需要消除血清的情况下，可以用条件无血清培养基或10%细胞培养级BSA增强生长培养基元件。
- 以适当的浓度冷冻细胞
在冷冻前1-2天传代细胞或更新生长介质可确保细胞存活并处于活跃的生长期。例如，当采集用于冷冻时，贴壁细胞应该在大约70 - 80%的融合度。
- 尽早冷冻你的细胞
为了保持细胞存活，冷冻过程应在冷冻介质应用后尽早开始。这可以通过在移动到冷冻容器之前将冷冻瓶放在湿冰上来提高。
- 使用合适的冷冻介质
低温保存介质通常由生长介质、低温保护剂(如DMSO或甘油)和蛋白质供应(通常是血清)组成。即使需要冷冻保护剂来减少解冻过程中的细胞压力，血清也可以省略。
- 保持细胞在液氮气相
为了避免液体到达试管，细胞应该保存在液氮的气相中。这不仅会导致感染，而且还会导致小瓶失效，因为液体在冷冻时膨胀。
- 在解冻电池使用之前，请确保它们仍处于冷冻状态
为了避免影响细胞的生存能力，冷冻保存的细胞永远不应该用湿冰从液氮运送到实验室。应始终提供干冰或液氮容器，特别是在长距离或长时间运输细胞时。
- 快速解冻冷冻细胞
从液氮存储中取出细胞后，将冷冻瓶放入37°C的水浴中，直到内容物解冻。为了保持活力，应及时将细胞转移到大量预加热的培养基中，培养基更脆弱细胞类型(干细胞，原代细胞)滴加。
- 检查细胞是否健康
快速彻底的检查可以提供细胞健康的早期迹象，例如确定烧瓶上粘附细胞的存在。在初始传递期间，任何发现都可以通过可行性检查来支持。
必威体育客户端网站Kosheeka提供广泛的定制主细胞以细胞为基础的检测来维持细胞的健康和活力。更多信息可以在这里找到。