在今天的全球背景下，哺乳动物细胞培养是生命科学领域不可或缺的福音。它是调控、繁殖和分化等多种学科的基础，也是实现基因操纵的基础。
包括病毒疫苗在内的许多生物技术产品基本上依赖于大规模培养动物细胞系;随着Covid-19大流行的持续，如果没有动物细胞株，就不可能制造病毒疫苗。因此，人们有一个想法，维持细胞培养的纯度和避免污染是多么重要。因此，如果你想让你的哺乳动物细胞培养繁荣，这里有5个提示如何做到这一点!
- 细胞分析和质量检查
质量在动物细胞培养的各个方面都至关重要。所用细胞的质量必然会影响培养的质量以及由此产生的科学数据和产品。必威精装版App因此，在继续之前，必须分析和检查细胞的污染。一些短期确定的方法包括:
- 进行活力分析-台番蓝排除试验或碘化丙啶试验
- 检查微生物污染-真菌和细菌污染可以通过肉眼或在相位对比光显微镜下做一个简短的测试。其他方法包括- DAPI染色(支原体)或革兰氏染色。
如果要分析干细胞，可以进行内毒素检测和HLA检测。此外，CD标记物可用于流式细胞术对其进行表征。
- 细胞系认证与防止混合种群
动物细胞培养是许多实验室用于生物医学和临床研究的重要工具。betway必威官方网站细胞系认证是必需的，因为无数细胞系被其他细胞错误或污染，导致发表的数据作废，浪费时间和实验室资源。当两个或多个装有不同细胞类型的烧瓶放在同一个罩内时，交叉污染的可能性很大，这反过来又会影响各自细胞系的真实性，并有可能出现混合种群的情况。为了避免这种情况，
- 避免在同一罩内保持多种电池类型。
- 如果需要保留一种以上的细胞类型，为不同的细胞类型制作单独的架子，这样就不会发生混合。
- 细胞形态是关键
定期检查培养细胞的形态(即它们的形状和外观)对于实验的成功至关重要。确认细胞的健康状态有助于发现任何早期污染的迹象，并在其扩散到其他实验室培养之前加以控制。
- 在良好的相反差光显微镜上评估整体细胞形态、细胞质结构、平坦度和轮廓特征还有助于了解所操作的细胞系的形态，即使一些哺乳动物细胞株具有类似的形态，熟悉这些形态也是必不可少的。
- 进行台盼蓝和碘化丙啶试验可以帮助检查细胞是否处于完整形式。
- 透射电子显微镜(TEM)，扫描电子显微镜(SEM)，原子力显微镜(AFM)也可以进行。
- 快速冻结/解冻
有时细胞不能立即培养，因此必须保存和储存它们以备将来的实验。冷冻是储存细胞的最好方法。然而，冷冻会影响多种因素，如增殖、细胞因子分泌、蛋白质产生和mRNA表达。冻融过程的附加惩罚是由晶体形成引起的机械损伤、物理特性的改变和细胞组件的形状。为了避免这些问题，可以采取以下措施:
- 在冷冻介质中加入低温保护剂可以防止晶体发育和渗透损伤。例如-二甲基亚砜(DMSO)，甘油，乙二醇或羟乙基。
- Caspase抑制剂可以添加到冷冻介质中，以避免因应激引起的细胞凋亡。
- 使用含有酒精(即异丙醇)的特殊容器包围样管有助于维持温度梯度，避免细胞破裂。
- 开发新的细胞系
开发细胞系对于生物制剂生产、药物筛选和基因功能研究等各种应用都很重要。与细胞系相关的主要问题是通过额外的细胞系和支原体进行污染。为了避免任何形式的污染，可以遵循一些基本步骤，包括:
- 在第一次传代或传代后，一些细胞瓶应立即冷冻保存作为备份。
- 要进行传代培养的细胞必须在培养基合流度达到80%时进行分离，因为如果培养基达到最大合流度，细胞将由于接触抑制而停止生长，从而影响细胞的生长速度和形态。
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参考文献
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